英國OXOID CT0107B 阿米卡星藥敏實驗紙片

英國OXOID CT0107B 阿米卡星藥敏實驗紙片?說明書

【產品名稱】

通用名稱：英國OXOID CT0107B 阿米卡星藥敏實驗紙片

英文名稱：Amikacin Susceptibility Test Disc

【包裝規格】

5×50 片 / 盒

【預期用途】

本產品旨在通過體外實驗檢測阿米卡星對細菌的有效性。有幾種實驗室方法

適用于紙片擴散法。用戶應當參考當地的指導原則，獲取關于培養基的選擇，接

種量，培養條件和抑菌圈判讀標準的詳細信息。

【檢測原理】

在濾紙片中滲入一定量的抗生素，然后將紙片貼在事先接種了測試菌液的瓊

脂平板表面，抗生素擴散形成濃度梯度。培養結束后，檢測紙片周圍的抑菌圈，

并與特定抗生素產生的認可的抑菌圈范圍相比較，就可以判斷細菌對抗生素的敏

感程度。

【主要組成成份】

每張紙片直徑 6 毫米，含四環素 30ug，紙片兩面都清晰印有抗生素編碼縮寫

AK 和劑量 30ug。

需要但未提供的材料

裝有適量培養基的瓊脂平板、接種用的混懸培養基、無菌接種環和拭子、無

菌鑷子、麥氏濁度標準液、培養箱、改良的氣體環境、抗生素紙片分配器、質控菌株、

測量抑菌環大小的工具，以及當地標準方法的判讀標準。

【儲存條件及有效期】

未開封的塑料管必須存放在 -20℃—8℃，有效期 3 年，直至需要方可取出。

未開封的塑料管在開封前回復至室溫以減少冷凝水。塑料管一旦開封，需要放置

于分配器內保存（請確認分配器內放置了干燥劑）。分配器在冷藏室中保存，打

開前應回復至室溫。如果塑料管不是放置于分配器中，用戶應當保證紙片保存在

冷藏室中并避免潮濕。一旦塑料管開封，建議保存時間不要超過 7 天。只適于未

開封并在適宜條件下儲存的產品。

【樣本要求】

供試微生物應是從培養基中挑取的新鮮的、純的臨床分離株。如有可能，標

本應在開始抗微生物治療前，就從患者處采集。

【檢驗方法】

用法：

本品可用于多種標準的檢測方法，其中包括但限于 BSAC、CDS、DIN、

CLSI M2 或 EUCAST。請參考現行的當地指導原則，獲取關于培養基的選擇，

接種量和培養條件的詳細信息。

CLSI 方法小結：（其它標準會有差異）

1CN140692

CT0107B

培養基：Mueller-Hinton 瓊脂用于檢測非苛養微生物。含 5% 羊血的 Mueller

Hinton 用于檢測腦膜炎奈瑟氏菌和鏈球菌，含 1% 精制生長添加劑的 GC 瓊脂用

于檢測淋病奈瑟氏菌，嗜血桿菌檢測培養基用于檢測流感嗜血桿菌和副流感嗜血

桿菌。關于檢測其它苛養菌或罕見菌的培養基和生長條件可參考 CLSI 第 M45 章。

平板培養基和藥敏紙片在使用前要回復至室溫。平板培養基在接種前不應有過多水分。

供試微生物：采取適當的檢測方法來核實供試微生物的推測鑒定結果。采用

直接菌落法或生長法制備的標準化接種物應在 15 分鐘內接種到制備好的平板培

養基上：生長法—用接種環挑取 3 至 5 個形態上相似的獨立菌落，并移至 4-5ml

的胰蛋白胨大豆肉湯或類似培養基中，在 35℃下培養 2-6 小時。用無菌生理鹽

水或肉湯調整濁度，使之達到 0.5 個麥氏濁度標準（將 0.5ml 的 0.048M 氯化鋇

[1.175%wt/vol BaCl2.2H2O] 加 到 99.5ml 的 0.18mol/l 硫 酸 [1%vol/vol] 中 ,

制成 0.5 個麥氏濁度標準液—避光保存）。直接菌落法（葡萄球菌和鏈球菌的方法）—在非選擇性瓊脂上挑取分離的菌落，至于無菌生理鹽水或肉湯中，并

制成等于 0.5 麥氏濁度標準的菌懸液。

接種：將無菌拭子浸入菌懸液中，在試管壁上旋轉按壓，擠出多余的培養液。在

平板培養基表面至少沿著三個方向涂布平板表面。接種后 15 分鐘內將藥敏紙片置

于平板上。

藥敏紙片：使用前將藥敏紙片回復至室溫。單塊平板培養基上放置的藥敏紙片

數量如下：

在貼上藥敏紙片的 15 分鐘內翻轉平板，并按照下面的規定培養：

* 葡萄球菌和腸球菌需要培養 24 小時。耐甲氧西林的葡萄球菌可能在溫度超過

35℃的條件無法檢出。

質量控制程序：

建議以適當的間隔檢測質控菌株；既可在每次檢測時進行質控，也可以根據國家

標準機構提供的抗生素敏感性檢測指南推薦的程序進行質控。如果某種質控菌株檢測菌

單塊平板推薦的藥敏紙片數量：

淋病奈瑟氏菌、副流感嗜血桿菌、流感嗜血桿菌和鏈球菌

9 張 /140-150mm 平板，

或者 4 張 /90-100mm 平板

腦膜炎奈瑟氏菌

5 張 /140-150mm 平板，

或者 2 張 /90-100mm 平板

非苛養菌

12 張 /140-150mm 平板，

或者 5 張 /90-100mm 平板

檢測菌：

培養要求：

流感嗜血桿菌和副流感嗜血桿菌

5%CO2,35±2℃，16-18 小時

淋病奈瑟氏菌

5%CO2,36±1℃，20-24 小時

腦膜炎奈瑟氏菌

5%CO2,35±2℃，20-24 小時

非苛養菌 *

需氧，35±2℃，16-18 小時

鏈球菌

5%CO2,35±2℃，20-24 小時CN14069

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CT0107B

在貼上藥敏紙片的 15 分鐘內翻轉平板，并按照下面的規定培養：

K．對于沙門氏菌和志賀氏菌，氨基糖甙類藥物可能在體外具有活性，但在臨床

上卻沒有效果并且不應報告為敏感。

【檢驗結果的解釋】

培養后，測量*抑菌區域的直徑，讀數到毫米數值。抑菌環的邊緣應為肉眼

可以發現的無明顯微生物生長的區域。對于血平板，應在反射光環境中對平板上

表面進行判讀（不判讀溶血區域邊緣，僅包括細菌生長邊緣）。所有其他培養基

應在黑色背景和反射光環境中對平板背面進行判讀（葡萄球菌和腸球菌除外，應

在透射光下進行判讀 - 微弱的生長提示耐藥）。對于變形桿菌，應忽視明顯抑制

區域內的遷徙性生長形成的薄膜。對結果進行判讀的完整說明可依照 CLSI 方法

，請參考現行版的 CLSIM100 標準。附表只提供了 CLSI 標準所述的藥物 / 濃度。

【檢驗方法的局限性】

本產品供體外診斷使用，僅用于指示供試微生物的體內敏感性。選擇何種抗微生

物藥物進行測試和報告必須由每個臨床實驗室來決定。臨床醫生負責決定使用何

種抗生素對抗供試微生物。

【參考值（參考范圍）】

摘自 CLSI 文件 M100-S20(M02-A10)：“藥敏紙片擴散法補充表”抗微生物敏感

性檢測性能標準。

試驗培養物（抑菌環直徑，mm）

抗生素

藥敏紙片代碼 效價

耐藥

介于兩者之間 敏感

阿米卡星

AK

30μg

腸桿菌 K、 銅

綠假單胞菌、

不動桿菌和葡萄球菌

≤ 14  15-16

≥ 17

針對一種特定抗生素的結果超出規定范圍以外，不得出具患者檢測報告，并不應

使用該藥敏紙片，直至確定產生差異的原因（如培養基、灌裝量、接種物、培養

條件、質控菌株、不適宜的儲存條件或紙片使用不當）。

表 1 摘自 CLSI 文件 M100-S20(M02-A10)：“藥敏紙片擴散法補充表”抗微生

物敏感性檢測性能標準。

質量菌株（抑菌環直徑，mm）

【注意事項】

僅供體外診斷使用。遵守使用說明。整個操作過程中都要采用無菌技術并遵守

針對所有微生物危害建立的預防措施的規定。按照生物危害廢棄物操作和處理指

南的指導，必須對使用后的培養物、容器和其它被污染物進行滅菌。勿使用過期

產品。一旦開啟紙筒，需確保其存放在黑暗干燥的環境中，以防止抗生素降解。

如果紙片在推薦的質控菌株培養基上未產生預期的抑菌環，需檢查全部操作流程。